一、透析原理
自Thomas Graham 1861年發(fā)明透析方法以來,透析已成為生物化學(xué)實驗室最簡便最常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中,除鹽、除少量有機溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。
透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。
透析的動力是擴散壓,擴散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。

二、透析袋的選擇
1、正確選擇合適的截留分子量
截留分子量的選擇是以預(yù)留在膜內(nèi)的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎(chǔ)。為達到合理有效的分離,需分離的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25。選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率。
透析袋截留分子量選擇參照表(常見物質(zhì)分子量和直徑大小,主要是蛋白類物質(zhì))。

透析袋孔徑參考表

2、正確選擇扁平寬度
透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴散距離較長透析較慢。為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的透析袋。

3、透析袋的化學(xué)兼容性
化學(xué)兼容性主要用作使用指導(dǎo),不作為化學(xué)相容的保證。溫度、濃度、長時間曝光等因素的改變可能影響產(chǎn)品的使用。建議您自設(shè)條件進行測試。

三、透析袋使用方法
百瑞極可提供干型透析袋和即用型透析袋,滿足不同實驗場景的需求。
百瑞極干型透析袋,甘油涂層,使用前需預(yù)處理:
1、把透析袋剪成適當(dāng)長度(10-20cm)的小段。
2、在大體積(500mL)的2%(W/V)的碳酸氫鈉和1mmol/L EDTA (pH=8.0)中將透析袋煮沸10min。
3、用蒸餾水徹底清洗透析袋。
4、放在500mL的1 mmol/L EDTA (pH=8.0)中將之煮沸10min。
5、冷卻后,置于20%的酒精中,放于4℃冰箱,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時起取用透析袋必須戴手套。
6、在使用前要用蒸餾水將透析袋里外加以清洗干凈。
百瑞極即用型透析袋,無需預(yù)處理,用水清洗即可使用:
1、先帶好手套,把透析袋剪成適當(dāng)長度(10cm 左右)的小段,長度可以根據(jù)需要,但必須有足夠的容器來容納。
2、用蒸餾水徹底清洗透析袋,兩頭用手微微捏住,檢查是否有漏袋。透析袋保存液含有防腐劑,對活性物質(zhì)有抑制作用,至少用蒸餾水(純水、去離子水均可)反復(fù)沖洗三次,有時間最好用蒸餾水浸泡30分鐘再使用。
3、不使用的透析膜放回儲存液中,密封保存,接觸透析膜過程中必須戴手套。
4、使用時,一端用透析袋夾子夾緊,灌滿水后,用手指適當(dāng)加壓,檢查不漏,另一頭也同樣反復(fù)一次,以免夾子不夠緊。然后裝入樣品,通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,袋外的水和緩沖液過量進入袋內(nèi)將袋脹破。裝完樣品后,用夾子夾緊袋口,即可進行透析。為了加快透析速度,除多次更換透析緩沖液外,還可使用磁力攪拌器。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。根據(jù)樣品濃度決定透析時間,也可以過夜透析,透析時間在24~48小時為宜。用線吊著透析袋,使透析袋處于懸浮狀態(tài),也可以加速透析速度。
四、百瑞極相關(guān)產(chǎn)品
| 品牌 | 貨號 | 中文名稱 | 規(guī)格 |
| Biorigin | BN22101 | 即用型透析袋 扁寬18 1KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22102 | 即用型透析袋 扁寬38 1KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22103 | 即用型透析袋 扁寬45 1KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22104 | 即用型透析袋 扁寬18 2KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22105 | 即用型透析袋 扁寬38 2KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22106 | 即用型透析袋 扁寬45 2KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22107 | 即用型透析袋 扁寬18 3.5KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22108 | 即用型透析袋 扁寬45 3.5KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22109 | 即用型透析袋 扁寬54 3.5KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22111 | 即用型透析袋 扁寬12 8KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22113 | 即用型透析袋 扁寬24 8KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22114 | 即用型透析袋 扁寬32 8KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22115 | 即用型透析袋 扁寬40 8KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22116 | 即用型透析袋 扁寬50 8KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22118 | 即用型透析袋 扁寬12 10KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22119 | 即用型透析袋 扁寬18 10KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22120 | 即用型透析袋 扁寬24 10KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22121 | 即用型透析袋 扁寬32 10KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22122 | 即用型透析袋 扁寬45 10KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22124 | 即用型透析袋 扁寬12 15KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22126 | 即用型透析袋 扁寬24 15KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22127 | 即用型透析袋 扁寬32 15KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22128 | 即用型透析袋 扁寬45 15KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22130 | 即用型透析袋 扁寬12 25KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22131 | 即用型透析袋 扁寬18 25KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22133 | 即用型透析袋 扁寬28 25KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22134 | 即用型透析袋 扁寬34 25KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22136 | 即用型透析袋 扁寬12 50KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22137 | 即用型透析袋 扁寬28 50KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22138 | 即用型透析袋 扁寬34 50KD RC膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22139 | 即用型透析袋 扁平10 (100-500D) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22140 | 即用型透析袋 扁平16 (100-500D) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22141 | 即用型透析袋 扁平24 (100-500D) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22142 | 即用型透析袋 扁平31 (100-500D) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22143 | 即用型透析袋 扁平10(500-1000D) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22144 | 即用型透析袋 扁平16(500-1000D) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22145 | 即用型透析袋 扁平24(500-1000D) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22146 | 即用型透析袋 扁平31(500-1000D) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22147 | 即用型透析袋 扁平10 (3.5-5KD) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22148 | 即用型透析袋 扁平16 (3.5-5KD) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22149 | 即用型透析袋 扁平24 (3.5-5KD) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22150 | 即用型透析袋 扁平31 (3.5-5KD) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22151 | 即用型透析袋 扁平10 (8-10KD) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22152 | 即用型透析袋 扁平16 (8-10KD) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22153 | 即用型透析袋 扁平24 (8-10KD) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22154 | 即用型透析袋 扁平31 (8-10KD) CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22155 | 即用型透析袋 扁平10 20KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22156 | 即用型透析袋 扁平16 20KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22157 | 即用型透析袋 扁平24 20KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22158 | 即用型透析袋 扁平31 20KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22159 | 即用型透析袋 扁平10 100KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22160 | 即用型透析袋 扁平16 100KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22161 | 即用型透析袋 扁平24 100KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22162 | 即用型透析袋 扁平31 100KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22163 | 即用型透析袋 扁平16 300KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22164 | 即用型透析袋 扁平31 300KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22165 | 即用型透析袋 扁平16 1000KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22166 | 即用型透析袋 扁平31 1000KD CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22167 | 即用型透析袋 扁寬10 50000D CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22168 | 即用型透析袋 扁寬16 50000D CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22169 | 即用型透析袋 扁平24 50000D CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22170 | 即用型透析袋 扁平31 50000D CE膜 | 0.5米/1米 |
| Biorigin | BN22201 | 透析袋夾子4cm | 1個 |
| Biorigin | BN22202 | 透析袋夾子6cm | 1個 |
| Biorigin | BN22203 | 透析袋夾子8cm | 1個 |
| Biorigin | BN22244 | MD25-14干型透析袋 D16mm (14000D) | 5m |
| Biorigin | BN22245 | MD34-3.5干型透析袋 D22mm(3500D) | 5m |
| Biorigin | BN22246 | MD77-14干型透析袋 D49mm (14000D) | 5m |
| Biorigin | BN22247 | MD10-14干型透析袋 D6mm (14000D) | 5m |
| Biorigin | BN22248 | MD34-14干型透析袋 D22mm (14000D) | 5m |
| Biorigin | BN22249 | MD44-14干型透析袋 D28mm (14000D) | 5m |
| Biorigin | BN22250 | MD44-3.5干型透析袋 D28mm(3500D) | 5m |
| Biorigin | BN22251 | MD55-3.5干型透析袋 D35mm(3500D) | 5m |
| Biorigin | BN22252 | MD55干型透析袋 D35mm (6-8KD) | 5m |
| Biorigin | BN22253 | MD25干型透析袋D16(25KD),RC膜 | 5m |
| Biorigin | BN24245 | MD34-7干型透析袋D22mm(7000D) | 5m |
| Biorigin | BN24501 | MD44-1干型透析袋D28mm(44-1000D) | 5m |
| Biorigin | BN24534 | MD44-2干型透析袋D28mm(44-2000D) | 5m |
| Biorigin | BN24591 | MD55-1 干型透析袋D35mm(55-1000D) | 5m |
| Biorigin | BN24725 | MD44(8-14KD) 干型透析袋D28mm | 5m |
| Biorigin | BN22254 | MD25-1干型透析袋 D16mm(1000D) | 5m |
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